Calcein,AM

產(chǎn)品貨號：C2200

儲存條件：-20℃，干燥避光保存，保質(zhì)期12個月

產(chǎn)品描述

Calcein, AM 是一種可對活細胞進行熒光標記的細胞染色試劑，它穿透細胞膜進入細胞后被細胞內(nèi)的酯酶剪切形成 Calcein，從而被滯留在細胞內(nèi)，發(fā)出強綠色熒光。與其它同類試劑（如 BCECF, AM 和 CFDA）相比，Calcein, AM 的細胞毒性很低。Calcein 的激發(fā)和發(fā)射波長分別為 490 nm 和 515 nm。

Calcein, AM 僅對活細胞染色。作為核染色染料的 PI 不能穿過活細胞的細胞膜，它穿過死細胞膜的無序區(qū)域而到達細胞核，并嵌入細胞的 DNA 雙螺旋從而產(chǎn)生紅色熒光（激發(fā)：535 nm，發(fā)射：617 nm），因此 PI 僅對死細胞染色。由于 Calcein 和 PI-DNA 都可被 490nm 激發(fā)，因此可用熒光顯微鏡同時觀察活細胞和死細胞。用 545 nm 激發(fā)，僅可觀察到死細胞。根據(jù)以上特點，Calcein, AM 和 PI 經(jīng)常被結(jié)合用來作為活細胞和死細胞的雙重染色。由于不同細胞系的best染色條件不同，我們建議個別確定 Calcein, AM 和 PI 的合適濃度。

產(chǎn)品性質(zhì)

操作說明

1）用DMSO 制備1 mM 的Calcein, AM溶液，并用PBS 將其稀釋制成1～50μM的Calcein, AM 溶液①

2）將 1/10 細胞培養(yǎng)基體積的 Calcein, AM 溶液加入到細胞培養(yǎng)基中②。

3）在 37℃培養(yǎng)細胞 15～30 分鐘。

4）用 PBS 或適當?shù)木彌_液洗滌細胞兩次。

5）用 490 nm 激發(fā)波長，515 nm 發(fā)射波長的濾光片的熒光顯微鏡觀察細胞

注：如果 Calcein, AM 很難進入細胞，可以使用表面活性劑，如 Pluronic F127 。 也可以用 1/10 濃度的 Calcein, AM 溶液代替培養(yǎng)基。

注意事項

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

本品僅用于實驗研究。