G25 脫鹽離心柱（0.7ml）

貨號：M1607

存儲條件：4-30度保存

產(chǎn)品簡介

LABLEAD G25離心脫鹽柱的介質(zhì)是一類以葡聚糖為基質(zhì)的凝膠過濾層析介質(zhì)，其工作原理主要是利用具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的葡聚糖凝膠的分子篩作用,根據(jù)被分離物質(zhì)的分子大小不同來進行分離。G25離心脫鹽柱，對鹽和小分子的滯留率在95%以上，幾乎等體積回收，樣品不會被稀釋可以在出色地完成蛋白質(zhì)脫鹽的同時保持ji高的回收率。無需裝柱代替比較耗時的傳統(tǒng)透析處理，以達到快速純化蛋白質(zhì)/替換蛋白質(zhì)緩沖液的目的。只需簡單的幾次離心，即可完成樣品的脫鹽或緩沖液置換實驗。

產(chǎn)品用途

1、脫鹽

將蛋白質(zhì)同其他鹽類小分子分離開來，廣義的脫鹽還包括去除其他的化學小分子，包括咪嘩、GSH、苯fen等。

2、緩沖液置換

將蛋白溶液從現(xiàn)有溶液置換到更合適的緩沖液中。比如離子交換、電泳等應(yīng)用的前處理。

3、樣品清除

將樣品中的某些組分去除，避免對目標產(chǎn)物的影響，包括質(zhì)譜樣品預(yù)處理、化學交聯(lián)或標記單體的去除等等。

產(chǎn)品特點

1、操作方便，免去了繁瑣的透析過程，10分鐘內(nèi)即可完成樣品處理。

2、建議一次性使用(也可再生后重復(fù)使用)，穩(wěn)定性好，在所用常用緩沖液體(PBS，Tris-Cl、碳酸鈉一碳suan氫鈉等)中穩(wěn)定。

操作步驟

提前準備1.5mL或2mL離心管當做收集管。

1、平脫鹽柱

1)將離心脫鹽柱下方堵頭去除，先向一個方向輕微扭轉(zhuǎn)，再向另一個方向扭轉(zhuǎn)，然后放回收集管中，1000xg離心1分鐘，倒掉收集管中保護液。

2) 將離心柱重新放回收集管中，向離心柱中加入250ul平衡液(樣品脫鹽后想要置換的緩沖液)，靜置待平衡液全部滲入填料后，1000xg離心1分鐘，重復(fù)三次，去除收集液。

2、樣品處理

將離心柱放入干凈的EP管中,加入100ul~200ul樣品，靜置3min，1000xg離心1分鐘，EP管中溶液即為脫鹽后的樣品。

3、脫鹽柱的再生和保存將使用過的脫鹽柱，加入300ul 0.5M NaOH溶液，靜置2min，1000xg離心1min，重復(fù)兩次。然后加入300ul去離子水，靜置2min，1000xg離心1min，重復(fù)三次。將處理好的脫鹽柱，加入20%乙醇溶液，下端放上紅色堵頭，擰緊蓋子4~30°C保存即可。

回收效果

樣品脫鹽后的回收率與樣品的濃度，以及上樣體積相關(guān)。樣品濃度越高，其回收率越高；同時在推薦的樣品上樣量范圍內(nèi)，上樣量越大，其回收率也會隨之升高。通常脫鹽后蛋白的回收率在80%~95%。

注意事項

1、為了防止可能的離子相互作用，建議在脫鹽期間和最終樣品緩沖液保持低鹽濃度(25mM NaCl)。如果需要避免NaCl的存在可以使用揮發(fā)性緩沖劑，例如100mM乙酸銨或100 mM碳酸氫銨；

2、樣品處理量要在柱子處理范圍內(nèi),過多會導致脫鹽不wan全,過少會導致樣品回收率下降；

3、填料在高濃度醇溶液或飽和鹽溶液中會有失水收縮現(xiàn)象，請勿將上述溶液進行過柱；

4、加樣時盡量均勻加至管中心位置；

5、當樣品濃度過低時,需先將樣品濃縮到所需體積或所需濃度。